实验原理
RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,,,,,RNA连系尊龙凯时免疫沉淀),,,,,是研究细胞内RNA与尊龙凯时连系情形的技术,,,,,是相识转录后调控网络动态历程的有力工具。。。。。。该技术主要是运?目的蛋?的特异性抗体把响应的RNA-尊龙凯时复合物沉淀下来,,,,,然后经由疏散纯化对连系在复合物上的RNA举行q-PCR验证或者高通量测序剖析。。。。。。

实验流程


试剂盒组分

常见问题与解答
Q1:怎样判断RIP实验乐成???
RIP后WB检测IP组和input组检测到目的尊龙凯时信号即判断RIP实验乐成。。。。。。
Q2:IP和IgG样本Ct值没有差别
多方面缘故原由造成:
1.抗体没有富集到RNA,,,,,可替换抗体实验;;;;
2.IgG配景过高,,,,,可增添洗涤次数或镌汰免疫沉淀办法RNA投入量。。。。。。
Q3:消融曲线异常
泛起非特异扩增或有引物二聚体等情形,,,,,需重新设计引物。。。。。。
Q4:拉下样本RNA浓度过低
1.样本投入量过少,,,,,思量增添样本初始投入量。。。。。。
2.裂解不完全,,,,,组织样本未研磨充分,,,,,或者用强裂解液举行裂解。。。。。。
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相关技术效劳
? 双荧光素酶报告系统 ? 酵母双杂交 ? EMSA ? RNA pull-down
? RIP-qPCR ? DNA pull-down ? ChIP-qPCR ? 酵母单杂交
尊龙凯时


